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沒有顏色非常不利于對(duì)組織和細(xì)胞的觀察,因此,人們發(fā)明了多種給組織和細(xì)胞上色的方法,稱為染色(stain)。其中蘇木精-伊紅染色(HE染色)是常用的染色之一。在HE染色過程中總會(huì)出現(xiàn)各種各樣的問題,該如何解決呢?
HE染色后鏡下看到很多小黑點(diǎn)或小水珠似的物質(zhì)
脫水過程不徹底,造成的水霧殘留;中性樹膠封片前,組織切片已經(jīng)干涸,此時(shí)樹膠不容易滲入組織間,容易殘留細(xì)小的氣泡。此時(shí)應(yīng)該用二甲苯徹底脫去封片膠,并重新封片。
不管怎么操作,切片始終無法染色或淡染
這種情況一般因?yàn)榻M織固定時(shí)采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時(shí)間太長;或者久置的甲醛變性分解為甲酸。補(bǔ)救:防患于未然,要么使用新鮮的中性甲醛固定,要么在存放的甲醛中加一點(diǎn)碳酸鈉中和甲酸。對(duì)于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定。對(duì)于已經(jīng)制出的片子,染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時(shí)以上,然后自來水漂洗5min,可改善染色。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中,補(bǔ)充染色媒介,增強(qiáng)蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上,單純的蘇木素與組織的親和力很弱)。